A contagem de aeróbios mesófilos ou contagem padrão em placas em um produto alimentício reflete a qualidade da matéria-prima, bem como as condições de processamento, manuseio e estocagem. O método de contagem em placas tradicionais requer 48h de incubação para a posterior leitura dos resultados
1 – INTRODUÇÃO
A Contagem Padrão em Placa ou contagem de aeróbios mesófilos em um produto alimentício, reflete a qualidade da matéria-prima, bem como as condições de processamento, manuseio e estocagem [11], permitindo estimar o tempo de prateleira do alimento em questão. Em termos laboratoriais, a execução desta técnica é bem simples, consistindo no plaqueamento de alíquotas da amostra, homogeneizada e diluída, em meio de cultura padrão como o "Plate Count Agar" (PCA). As placas são então, incubadas em condições de tempo e temperaturas adequados, para que haja o desenvolvimento das colônias que serão enumeradas com o auxílio de contadores automáticos. Trata-se, no entanto, de um processo bastante susceptível a erros, levando-se em consideração que: os microrganismos estão arranjados em pares, tétrades, cadeias e cachos. Conseqüentemente o número de colônias que aparecem na placa não correspondem ao número de células individuais presentes; quando muitas diluições precisam ser plaqueadas podem ocorrer erros; algumas partículas de alimentos podem ser confundidas com colônias, levando a um falso resultado positivo; o modo de leitura e a interpretação dos resultados, são muito subjetivos e podem variar de acordo com o analista; algumas colônias denominadas invasoras se espalham pela placa dificultando a contagem e a expressão do resultado final.
Outras limitações do método estariam relacionadas à fisiologia das diferentes espécies microbianas nos alimentos, que podem ter seu crescimento limitado quando são usadas condições padronizadas de temperatura, requerimento de nutrientes e potencial redox.
Visando minimizar estes problemas, surgiram os métodos alternativos que apresentam a conveniência de produzirem resultados mais rápidos, sensíveis e específicos, se comparados às técnicas convencionais. Tais métodos também podem oferecer economia de espaço e materiais, aumentando a produtividade laboratorial.
Numerosos métodos alternativos de contagem em placas estão disponíveis visando melhorar a eficiência desta determinação. Dentre eles, destacam-se o SimplateR Total Plate Count – Color Indicator (TPC-CI) e as placas PetrifilmR AC [20] para contagem de bactérias aeróbias totais. O sistema SimplateR é um método de enumeração de microrganismos em alimentos que fornece resultados em número mais provável (NMP), baseado no número de cavidades positivas de uma placa especialmente desenvolvida. Este método fundamenta-se na redução bioquímica do corante resazurina (azul) para resorufina (rosada) ou dehidro-resorufina (transparente). Outras variações de coloração como marrom, pêssego, branco e púrpura também são consideradas positivas [16, 18].